產(chǎn)品名 | 雙色SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X) |
別名 | |
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1.在室溫或不超過37℃的水浴中溶解雙色SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X)。水浴溶解后立即室溫存放,盡量避免長時間置于水浴中。使用完畢后置于-20℃保存。
2.按照每4微升蛋白樣品加入1微升雙色SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X)的比例,混合蛋白樣品和雙色蛋白上樣緩沖液(5X)。注:本產(chǎn)品稀釋至1X后也可以直接用于細(xì)胞或組織樣品的裂解。
3.100℃或沸水浴加熱3-5分鐘,以充分變性蛋白。
注意:如果起始時細(xì)胞或組織的用量較大,基因組DNA含量較高,煮沸3-5分鐘后有可能仍然比較粘稠或者有粘稠狀的半透明物體。此時需要再煮沸5-10分鐘或者加入適量稀釋成1X的雙
色蛋白上樣緩沖液后再煮沸3-5分鐘。充分煮沸后一方面可以使結(jié)合在基因組DNA上的蛋白充分釋放,同時可導(dǎo)致基因組DNA的部分?jǐn)嗔褟亩拐吵砀邢В@樣就不會影響后續(xù)的上樣
操作了。適當(dāng)超聲或使用1ml注射器反復(fù)抽吸也可以打斷基因組DNA從而使粘稠感消失。
4.冷卻到室溫后,直接上樣到SDS-PAGE膠加樣孔內(nèi)即可。
5.通常電泳至紅色或藍(lán)色染料到達(dá)膠的底端處附近即可停止電泳。
保存條件:
-20℃保存,至少一年有效。
注意事項:
本產(chǎn)品中含少量DTT,有輕微刺激性氣味,但不含劇毒的巰基乙醇。
本產(chǎn)品必須完全溶解后再使用。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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