產(chǎn)品名 | 免疫電鏡專用固定液 |
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產(chǎn)品簡介
透射電鏡可以觀察組織細胞的超微結(jié)構(gòu),免疫組織化學技術(shù)是用標記的特異性抗體(或抗原)對組織內(nèi)抗原(抗體)的分布進行檢測后用普通光鏡觀察。免疫電鏡技術(shù)則是電鏡技術(shù)與免疫化學技術(shù)結(jié)合的產(chǎn)物,根據(jù)抗原抗體的高度特異性結(jié)合原理,用高電子密度的標記物(如金、鐵蛋白等)從超微結(jié)構(gòu)水平檢測某些抗原性物質(zhì)的定位,換句話說,免疫電鏡是在透射電鏡下觀察超微結(jié)構(gòu)水平的免疫組織化學檢測結(jié)果,是免疫光鏡的延伸。免疫電鏡中最重要的問題之一是固定液的選擇,要求既要保持組織成分的抗原性,又要較好保存細胞的超微結(jié)構(gòu)。
本產(chǎn)品免疫電鏡專用固定液,是專門用于免疫電鏡前期組織樣本的固定液,能較好保存組織超微結(jié)構(gòu)及抗原。產(chǎn)品主要有效成分為甲醛和戊二醛。
使用說明
對于組織樣本,提前將免疫電鏡專用固定液裝在培養(yǎng)皿內(nèi)。取材時快速用鋒利刀片準確切取目的組織,立即浸沒于固定液內(nèi)。用手術(shù)刀在固定液中繼續(xù)切割成1 mm3大小。再將切割好的小組織塊轉(zhuǎn)移至裝有新鮮固定液的EP管內(nèi)室溫避光固定2h,之后轉(zhuǎn)移到4℃避光保存及運輸。對于貼壁細胞:培養(yǎng)好的細胞棄去培養(yǎng)基,待固定液恢復室溫后,加入免疫電鏡專用固定液室溫避光固定5 min左右。用細胞刮小心刮取細胞,低速離心收集細胞沉淀,再加固定液浸沒細胞沉淀室溫固定30min,然后轉(zhuǎn)移到4℃避光保存和運輸。如果對于細胞形態(tài)沒有要求,可將培養(yǎng)好的細胞用胰酶消化成細胞懸液后按照懸浮細胞固定步驟進行。
對于懸浮細胞:培養(yǎng)好的細胞經(jīng)低速離心,棄去培養(yǎng)基。加入恢復室溫的免疫電鏡專用固定液室溫避光固定30 min,轉(zhuǎn)4℃避光保存和運輸。
注意事項
1. 免疫電鏡檢測,前期樣本取材很關(guān)鍵,要求手法嫻熟,取材迅速,3 min內(nèi)完成目標位置的取材及固定。取材時盡量減少對組織的牽拉、挫傷、擠壓等機械損傷。組織取材體積盡量小,不要超過1 mm3。如果組織塊太大,組織內(nèi)部不能得到及時充分的固定,可能會影響超微結(jié)構(gòu)。
2. 固定的樣本需要4℃保存和運輸,過程中避免溫度過低導致固定液結(jié)晶。
3. 請在通風良好的環(huán)境下使用,并做好防護。
4. 用完后請及時擰緊瓶蓋,防止有效成分揮發(fā)。
5. 操作時請穿實驗服,并佩戴一次性手套。